تشخیص کمی تقلب بافت طیور در سوسیس و کالباس گاوی با استفاده از تکنیک real- time pcr

متاسفانه در سالهای اخیر تقلبات در تولید مواد غذایی افزایش چشمگیری داشته است و شناسایی بقایای بافتهای دامی در مواد خوراکی اهمیت روزافزونی یافته است. لذا تشخیص اختصاصی گونه ها و شناسایی گروه های حیوانی مورد استفاده در مواد غذایی امری ضروری می باشد. به دلیل حضور dna در همه سلول ها، می توان جهت تشخیص گونه حیوانی از آن استفاده کرد. یکی از بهترین راه های تشخیص تقلب در مواد غذایی استفاده از روشهای مولکولی مبتنی بر pcr می باشد. در این تحقیق از توالی 12s rrna از mtdna برای تشخیص تقلب استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی طراحی شده جایگاه ژنی 12s rrna طیور در واکنش زنجیره ای پلیمراز به منظور تشخیص تقلب در 13 نمونه سوسیس و کالباس به کار گرفته شد. قطعه ی 91 جفت بازی که با استفاده از آغازگر طیور تکثیر شد را در داخل ناقل ptz57r/t همسانه سازی شد. پلاسمید نوترکیب، استخراج گردید و پس از تعیین غلظت، رقت سازی شد و به عنوان dna استاندارد مورد استفاده قرار گرفت. نتایج با استفاده از منحنی استاندارد حاصل از پلاسمید حاوی قطعه ی 91 جفت بازی از جایگاه ژنی 12s rrna ) % 98= (r2 تعیین کمیت شدند. کمی سازی در دامنه ی وسیع خطی( 50 تا 5000000 کپی ) جهت ارزیابی تعداد کپی های قطعه ی هدف در نمونه های سوسیس و کالباس مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که 100% نمونه های سوسیس وکالباس بر پایه گوشت گاو دارای مقادیر متفاوتی از آلودگی بافت طیور بودند. بنابراین تکنیک real-time pcr می تواند به عنوان روشی مرجع برای تشخیص کمی دقیق تر تقلبات معرفی گردد.